人磷酸化Tau蛋白檢測試劑盒的使用注意事項(xiàng)主要包括以下幾點(diǎn):
一、樣本處理與保存
1、血清或血漿樣本需使用無熱原試管采集,離心后分離上清液,避免溶血。
2、樣本需在2-8℃避光保存,長期保存建議-20℃或更低溫度,避免反復(fù)凍融。
3、腦脊液等特殊樣本需按特定方法處理,確保無顆粒殘留。
二、檢測前準(zhǔn)備
1、試劑盒需提前20分鐘從冰箱取出,平衡至室溫后再使用。
2、標(biāo)準(zhǔn)品需按濃度梯度稀釋(如320、160、80、40、20、0pg/mL),確保線性范圍覆蓋樣本預(yù)期值。
三、操作規(guī)范
1、使用雙抗體夾心法ELISA時(shí),需嚴(yán)格按步驟加入樣本、標(biāo)準(zhǔn)品及酶標(biāo)抗體,溫育時(shí)間需充分。
2、顯色反應(yīng)后需及時(shí)終止,并在450nm波長下測定吸光度,避免延遲導(dǎo)致結(jié)果偏差。
四、質(zhì)量控制
1、重復(fù)性要求板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%,標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸R值需≥0.9600。
2、高濃度樣本需用稀釋液調(diào)整后復(fù)測,確保結(jié)果在檢測范圍內(nèi)。
五、特殊注意事項(xiàng)
1、單分子免疫熒光法(如Simoa®技術(shù))需配套專用設(shè)備,操作需遵循廠商指南。
2、磷酸化蛋白易降解,全程需保持低溫,并添加磷酸酶抑制劑。
若需進(jìn)一步了解不同檢測方法(如ELISA與單分子技術(shù))的差異,可參考相關(guān)技術(shù)指南。