【參數(shù)信息】

英文名稱：Fluorescein ConA；ConA-FITC；Fluorescein- Concanavalin A

中文名稱：FITC標(biāo)記刀豆球蛋白A ；FITC-刀豆蛋白A；熒光素標(biāo)記刀豆球蛋白A

糖特異性： 甘露糖

激發(fā)波長(zhǎng)：495 nm

發(fā)射波長(zhǎng)：515 nm

熒光：綠

應(yīng)用：免疫熒光、糖生物學(xué)

純度：≥95%

儲(chǔ)存條件：-20℃避光干燥

生產(chǎn)廠商：西安強(qiáng)化生物科技

【簡(jiǎn)單概述】（熒光素標(biāo)記刀豆球蛋白A）

Con A recognizes alpha-linked mannose as a "core oligosaccharide" present in many serum and membrane glycoproteins.

Fluorescein labeled Con A has the appropriate amount of fluorescent dye binding to provide the best staining properties for this lectin.

This conjugated substance basically does not contain unconjugated fluorescent dyes.

Con A 將 α 連接甘露糖識(shí)別為存在于許多血清和膜糖蛋白中的“核心低聚糖”。

熒光素標(biāo)記的 Con A 具有適量的熒光染料結(jié)合，可為該凝集素提供的染色性能。

這種共軛物質(zhì)基本上不含未共軛熒光染料。

Fluorescein ConA（異硫氰酸熒光素標(biāo)記的刀豆蛋白A）是一種重要的生物化學(xué)探針，由刀豆蛋白A（Concanavalin A, ConA）與熒光素（如FITC）通過(guò)共價(jià)結(jié)合形成。

其技術(shù)背景源于糖生物學(xué)和細(xì)胞表面標(biāo)記研究的進(jìn)展，旨在實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞表面糖基化結(jié)構(gòu)的特異性熒光標(biāo)記與可視化監(jiān)測(cè)。

【Fluorescein ConA作為親和探針，是如何通過(guò)ConA-瓊脂糖柱分離富集含甘露糖/葡萄糖的糖蛋的？分析一下原理和步驟】

（一）原理

ConA的糖結(jié)合特異性：

ConA是一種植物凝集素，可特異性識(shí)別并結(jié)合α-D-甘露糖、α-D-葡萄糖及其衍生物。

每個(gè)ConA四聚體含有4個(gè)糖結(jié)合位點(diǎn)，需依賴Ca2?和Mn2?維持結(jié)合活性。

熒光標(biāo)記的探針功能：

Fluorescein ConA中的熒光素標(biāo)記（如FITC）不干擾糖結(jié)合活性，但賦予探針熒光特性，便于后續(xù)檢測(cè)（如熒光顯微鏡或流式細(xì)胞術(shù)）。

在分離過(guò)程中，熒光標(biāo)記主要用于示蹤或驗(yàn)證結(jié)合效率，而非直接參與分離。

親和層析分離機(jī)制：

ConA通過(guò)共價(jià)鍵固定在瓊脂糖微球上，形成ConA-瓊脂糖柱。當(dāng)樣品流過(guò)層析柱時(shí)，含甘露糖/葡萄糖的糖蛋白與固定化ConA特異性結(jié)合，其他非靶標(biāo)蛋白被洗脫。隨后通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)性洗脫（如添加游離甘露糖）釋放目標(biāo)糖蛋白。

（二）步驟

1. 柱制備與平衡

將ConA-瓊脂糖凝膠填充至層析柱，用結(jié)合緩沖液平衡，以激活ConA的糖結(jié)合位點(diǎn)。

2. 樣品加載與結(jié)合

將樣品（如細(xì)胞裂解液或血清）加載至柱中，含甘露糖/葡萄糖的糖蛋白與ConA特異性結(jié)合，非結(jié)合成分通過(guò)洗滌緩沖液（如平衡緩沖液）去除。

3. 洗脫與收集

使用競(jìng)爭(zhēng)性洗脫緩沖液（如含200 mM α-甲基甘露糖苷或葡萄糖苷的緩沖液）解離結(jié)合糖蛋白。游離糖與ConA競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合位點(diǎn)，釋放目標(biāo)糖蛋白。

4. 檢測(cè)與驗(yàn)證

收集的洗脫液可通過(guò)熒光檢測(cè)（若使用Fluorescein ConA作為探針示蹤）或Western blot、質(zhì)譜進(jìn)一步分析糖蛋白組成。

【相關(guān)試劑】

AF405 PEG4 DBCO

AF405 C5馬來(lái)酰亞胺

剛果紅 CAS 573-58-0

AF488-刀豆蛋白A(ConA)探針

Annexin V-iFluor 488標(biāo)記

iFluor 790 acid iFluor 790酸

iFluor 830 acid iFluor 830 酸

mFluor UV 540琥珀酰亞胺酯

Buccutite PE-Cy7抗體標(biāo)記試劑盒

PerCP-iFluor 700 PerCP-iFluor 700 串聯(lián)染料

ATTO 488 acid ATTO 488酸 1443553-08-9

APC-XFD700 Tandem APC-XFD 700 串聯(lián)染料

APC-iFluor 720 Tandem APC-iFluor 720 串聯(lián)染料

APC-iFluor 710 Tandem APC-iFluor 710 串聯(lián)染料

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本試劑僅適用于科研實(shí)驗(yàn)，敬請(qǐng)知悉。