顯微計數(shù)法微粒分析儀的安全操作方法需嚴格遵循藥典規(guī)范及儀器操作要求,具體流程如下:
一、操作前準備
1、環(huán)境控制:需在層流凈化臺或超凈室中進行操作,環(huán)境微粒數(shù)需符合藥典標準(每50ml水中≥10μm微粒≤20粒,≥25μm微粒≤5粒)。
2、儀器校準:顯微鏡目鏡測微尺需定期校準,濾膜孔徑應(yīng)為0.45μm,且需檢查濾膜本身微粒數(shù)(≥10μm微粒≤5粒,無≥25μm微粒)。
3、樣品處理:凍干粉等易產(chǎn)生氣泡的樣品需輕搖混合,避免劇烈翻轉(zhuǎn)導致蛋白變性。
二、關(guān)鍵操作步驟
1、過濾與干燥:
使用夾式定量濾器過濾樣品,抽濾壓力需控制(蛋白類制劑可加壓至75托)。
濾膜需完全干燥,避免殘留水分干擾計數(shù)。
2、顯微觀察:
放大100倍,用標定目鏡測微尺測量≥10μm和≥25μm微粒,記錄形態(tài)(如纖維、金屬碎屑)。
高濃度樣品需稀釋,防止微粒重疊影響統(tǒng)計。
三、安全注意事項
1、防污染措施:鑷子、濾器等工具需用微粒檢查用水徹底清洗,避免交叉污染。
2、氣泡控制:黏度高的樣品需靜置脫氣,或采用旋轉(zhuǎn)混合替代翻轉(zhuǎn)。
3、數(shù)據(jù)復核:光阻法結(jié)果異常時,以顯微計數(shù)法為最終判定依據(jù)。
四、維護與驗證
1、定期用鏡臺測微尺校準顯微鏡,確保測量精度。
2、全自動機型需驗證自動過濾、干燥等流程的可靠性。