【參數(shù)信息】

英文名稱：iFluor 488 amine

中文名稱：iFluor 488胺

分子量：805.61

激發(fā)波長(zhǎng)：493nm

發(fā)射波長(zhǎng)：519nm

純度：≥95%

儲(chǔ)存條件：-20℃避光干燥

生產(chǎn)廠商：西安強(qiáng)化生物科技

【簡(jiǎn)單概述】（iFluor 488胺）

iFluor 488 amine is a green fluorescent dye with an excitation/emission wavelength of approximately 493/519 nm. Its emission properties are similar to those of Alexa Fluor 488 or FITC, but it has advantages in light stability and brightness.

The terminal of dye molecule contains primary amine group, which can be used to react with electrophilic functional groups such as carboxyl group, NHS ester or isocyanate, so it is convenient for chemical covalent coupling.

iFluor 488 amine is widely used in the labeling of antibodies, proteins, nucleic acids, microspheres and nanomaterials, as well as in the construction of specific fluorescent probes, FRET systems or enzyme substrates.

Its high brightness and low background fluorescence are suitable for flow cytometry, immunofluorescence, microscopic imaging and quantitative analysis experiments, and are a universal green dye choice for biomedical research and diagnostic development.

iFluor 488 amine 是一種綠色熒光染料，激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)約為493/519 nm，其發(fā)射性質(zhì)與 Alexa Fluor 488 或 FITC 相似，但在光穩(wěn)定性和亮度方面具優(yōu)勢(shì)。

染料分子末端含有伯胺基團(tuán)，可用于與含羧基、NHS 酯或異氰酸酯等親電官能團(tuán)反應(yīng)，方便進(jìn)行化學(xué)共價(jià)偶聯(lián)。

iFluor 488 amine 廣泛應(yīng)用于抗體、蛋白質(zhì)、核酸、微球及納米材料的標(biāo)記中，也適用于構(gòu)建特異性熒光探針、FRET 體系或酶底物。

其高亮度和較低背景熒光非常適合用于流式細(xì)胞術(shù)、免疫熒光、顯微成像和定量分析實(shí)驗(yàn)，是生物醫(yī)學(xué)研究和診斷開(kāi)發(fā)中的通用型綠色染料選擇。

【標(biāo)記步驟】

（一）染料準(zhǔn)備

將 iFluor 488 NHS Ester 粉末溶解于無(wú)水 DMSO（二甲基亞砜）中，配制成高濃度儲(chǔ)存液（如 1-10 mM），避光保存。

使用前用緩沖液（如 PBS 或 HBSS）稀釋至工作濃度（通常 1-10 μM），避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光或高溫環(huán)境。

（二）細(xì)胞處理

對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行洗滌（用無(wú)血清培養(yǎng)基或緩沖液去除游離氨基干擾物）。

加入染料工作液，在 37°C 避光孵育 15-30 分鐘（具體時(shí)間需優(yōu)化），避免過(guò)度標(biāo)記導(dǎo)致毒性。

（三）終止反應(yīng)與清洗

移除染料溶液，用預(yù)冷的緩沖液洗滌細(xì)胞 2-3 次，終止反應(yīng)并去除未結(jié)合染料。

必要時(shí)可加入含血清的培養(yǎng)基淬滅殘留活性染料。

（四）檢測(cè)與分析

通過(guò)熒光顯微鏡（激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)約 491/516 nm）或流式細(xì)胞術(shù)觀察標(biāo)記效果。

若標(biāo)記細(xì)胞內(nèi)目標(biāo)（如胞質(zhì)蛋白），需先使用溫和透化劑（如 0.1% Triton X-100）處理細(xì)胞，但需注意可能影響細(xì)胞活性。

關(guān)鍵特性與優(yōu)勢(shì)

高亮度與光穩(wěn)定性：iFluor 488 的熒光強(qiáng)度優(yōu)于傳統(tǒng) FITC，且對(duì) pH 變化（pH 4-10）不敏感，適合長(zhǎng)時(shí)間活細(xì)胞成像。

低毒性：在優(yōu)化濃度下對(duì)細(xì)胞活性影響較小，適用于活細(xì)胞動(dòng)態(tài)追蹤。

廣泛應(yīng)用：可用于標(biāo)記抗體、細(xì)胞表面蛋白（如受體）、胞內(nèi)抗原，或與凝集素（如 WGA）聯(lián)用標(biāo)記細(xì)胞膜。

【相關(guān)試劑】

ATTO 655 TCO

ATTO 488 TCO

ATTO 680 TCO

ATTO 700 TCO

Annexin V-iFluor 633標(biāo)記

Annexin V-iFluor 350標(biāo)記

AF350-羊抗兔免疫球蛋白(H+L)

AF488-羊抗兔免疫球蛋白(H+L)

AF594-標(biāo)記羊抗兔免疫球蛋白(H+L)

AF488酸 相當(dāng)于Alexa Fluor 488酸

AF488 酪胺(XFD488 tyramide reagent)

AF546 酪胺(XFD546 tyramide reagent)

AF594 酪胺(XFD594 tyramide reagent)

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本試劑僅適用于科研實(shí)驗(yàn)，敬請(qǐng)知悉。